自動(dòng)生物熒光成像系統(tǒng)在傳統(tǒng)落射熒光顯微鏡基礎(chǔ)上集成電動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤、電動(dòng)X-Y載物臺(tái)、自動(dòng)對(duì)焦及多孔板自動(dòng)掃描功能,通過軟件一站式完成大批量樣品的自動(dòng)采集、拼接與基礎(chǔ)三維重構(gòu)。

一、寬場(chǎng)熒光成像原理簡(jiǎn)述
ABM采用汞燈/金屬鹵素?zé)艋騆ED寬帶光源,經(jīng)激發(fā)濾片立方體(EX/EM/BS組)激發(fā)樣本熒光,由高靈敏CCD/sCMOS相機(jī)采集全視場(chǎng)熒光圖像(寬場(chǎng)模式,非共聚焦)。系統(tǒng)通過電動(dòng)Z軸做Z-stack采集后可做3D反卷積或最大強(qiáng)度投影,獲得近似層析效果。自動(dòng)對(duì)焦基于圖像對(duì)比度算法或紅外測(cè)距,保證多孔板長(zhǎng)時(shí)間序列中不跑焦。
二、自動(dòng)化功能特點(diǎn)
電動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換與倍率記憶:鼠標(biāo)一鍵切換物鏡,軟件自動(dòng)記錄放大倍率與像素尺寸。
AutoFocus:?jiǎn)吸c(diǎn)或多點(diǎn)聚焦評(píng)估,適合孔板不同孔液面微差異。
AutomaticWellPlateScanning:選擇6/12/24/96/384孔板類型后軟件生成坐標(biāo)圖,點(diǎn)擊即移入對(duì)應(yīng)孔并自動(dòng)對(duì)焦拍照。
Z-STACK+3DDeconvolution:支持Top/Bottom、Center/Range、Upper/Lower三種Z范圍設(shè)定,內(nèi)置3D反卷積算法重構(gòu)細(xì)胞核/細(xì)胞質(zhì)的空間分布。
TileStitching:設(shè)定掃描區(qū)域自動(dòng)拼合為大圖,適合組織切片或劃痕實(shí)驗(yàn)全景記錄。
TimeLapse:按間隔采集序列,監(jiān)測(cè)細(xì)胞遷移、分裂或轉(zhuǎn)染效率變化。
SNAP(單點(diǎn)/多點(diǎn)):?jiǎn)吸c(diǎn)快速抓圖或多點(diǎn)定義區(qū)域依次采集,便于對(duì)照比較。
三、典型應(yīng)用
細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率評(píng)估(GFP/RFP陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì))
免疫熒光染色強(qiáng)度半定量(核/胞質(zhì)ROI平均強(qiáng)度)
多孔板藥物處理后人源/動(dòng)物細(xì)胞形態(tài)與標(biāo)記物變化
固定細(xì)胞/組織片大視場(chǎng)拼接存檔
教學(xué)與常規(guī)科研中替代手動(dòng)熒光鏡檢,提高重復(fù)性與數(shù)據(jù)規(guī)范性
自動(dòng)生物熒光成像系統(tǒng)通過全電動(dòng)控制與智能化軟件將傳統(tǒng)熒光顯微鏡升級(jí)為可高通量、可定量的成像工作站,適合需批量采集與初步定量的細(xì)胞生物學(xué)與藥篩實(shí)驗(yàn)室使用。